Tại sao adn lại kết hợp với protein
|
TÁCH CHIẾT ADN TỪ MÁU NGOẠI VI/ MÁU CUỐNG RỐN
Show
DNA ISOLATION FROM PERIPHERAL BLOOD CELLS NGUYÊN LÝ Các tế bào có nhân đều chứa ADN - vật chất di truyền của toàn bộ cơ thể. ADN nằm trên nhiễm sắc thể bên trong nhân tế bào. Để tách được ADN người ta thường sử dụng các chất tẩy mạnh để phá màng tế bào và màng nhân, kết hợp với sử dụng các chất biến tính mạnh để loại bỏ các protein sau đó sử dụng cồn 96o kết hợp với điều kiện nhiệt độ thấp để thu được ADN một cách tinh sạch và nguyên vẹn. CHỈ ĐỊNH Sử dụng cho tất cả người bệnh có chỉ định làm xét nghiệm PCR. CHỐNG CHỈ ĐỊNH Không có chống chỉ định. CHUẨN BỊ Người thực hiện Kỹ thuật viên xét nghiệm Sinh học phân tử đã được đào tạo. Phương tiện - Hóa chất Phương tiện Buồng vô trùng (biology cabinet); Máy ly tâm tốc độ cao (tốc độ tối đa 14.000 vòng/phút); Máy vortex; Các loại pipet 10 µl, 20 µl, 100 µl, 200 µl, 1000 µl; Đầu côn có màng lọc; Ống eppendorf 1,5 ml vô trùng, không có enzym nucleaza; Ống PCR 0,2 ml vô trùng, không có enzym nucleaza; Tủ lạnh 4 - 80C, tủ âm sâu - 200C; Găng tay. Hóa chất Sử dụng kit tách ADN thương mại. Nếu tách thủ công thì sử dụng các sinh phẩm cần thiết để tách chiết ADN như proteinase K, đệm ly giải tế bào, phenol/chloroform, cồn tuyệt đối. Bệnh phẩm 2ml máu ngoại vi/máu cuống rốn chống đông bằng EDTA. CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH Lấy bệnh phẩm 2ml máu ngoại vi/máu cuống rốn chống đông bằng EDTA. Tiến hành kỹ thuật Phương pháp tách chiết ADN cơ bản bao gồm các giai đoạn chính sau: Phá màng tế bào và màng nhân: Bệnh phẩm được ủ trong một dung dịch gồm chất tẩy mạnh (như SDS, sarcosyl) và enzym phân hủy protein (proteinaza K). Mục tiêu của bước ủ này là để phá màng tế bào và màng nhân đồng thời để ức chế hoạt động của các enzym ADNaza nội bào và tách protein ra khỏi các phân tử ADN. Loại bỏ các protein: Sử dụng dung dịch phenol/chloroform để biến tính protein, làm cho protein tạo thành một lớp tủa rõ rệt sau khi ly tâm, dễ dàng loại bỏ khỏi hỗn dịch. Kết tủa ADN: Sử dụng cồn để tủa ADN trong điều kiện lạnh và thu nhận lại ADN bằng ly tâm. ADN cần phải hòa lại trong nước khử enzym nucleaza. NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ Sử dụng 5µl ADN thu được để điện di kiểm tra trên gel agarose 0,5 - 0,8%, đồng thời đo độ sạch bằng quang phổ (A260/A280). Chất lượng ADN tốt nếu chỉ xuất hiện một băng có kích thức lớn >10 kb và tinh sạch nếu A260/A280 trong khoảng 1,8 - 2,0. NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ
TÀI LIỆU THAM KHẢO Hồ Huỳnh Thuỳ Dương (1997). Các phương pháp tách chiết axit nucleic. Sinh học phân tử. NXB Giáo Dục, trang 124 - 125. A.Rolfs et at (1992). PCR: Clinical Diagnosis and Research. Springer Verlag, Berlin. Bạn đang thắc mắc về sự khác nhau giữa DNA và RNA? Bài viết dưới đây của MEDITOP sẽ giúp bạn tìm ra các điểm khác biệt giữa 2 loại phân tử này thông qua bài viết dưới đây. Bên cạnh đó, doanh nghiệp còn cung cấp đến bạn những thông tin về mối quan hệ giữa hai phân tử. Cùng xem để tìm hiểu chi tiết ngay nhé! >>>> XEM THÊM: Máy tách chiết DNA/RNA Axit Nucleic tự động trong thí nghiệm 1. Khái niệm DNA và RNA là 2 đại phân tử có vai trò quan trọng trong sự sống của tất cả sinh vật. Việc nắm rõ khái niệm của từng loại là cơ sở giúp dễ dàng phân biệt DNA và RNA. 1.1 DNA là gì?Ở người, DNA (Deoxyribonucleic Acid) là một chuỗi xoắn kép gồm các Deoxyribonucleotide. DNA mang thông tin di truyền dưới dạng các đoạn nucleotide đặc biệt và được gọi là gen. Các phân tử DNA trong tế bào gấp khúc chặt chẽ với các protein histone. Từ đó, các phân tử sẽ sắp xếp thành các cấu trúc giống như sợi dài gọi là nhiễm sắc thể. DNA 1.2 RNA là gì?RNA (Ribonucleic Acid) thường là một chuỗi đơn gồm những Ribonucleotide. RNA có chức năng mang thông điệp di truyền từ DNA đến vị trí tổng hợp protein và giúp cơ thể tổng hợp protein. RNA trong hầu hết các sinh vật đều không hoạt động như vật liệu di truyền.  RNA 2. Sự khác biệt giữa ADN và ARNSự khác biệt giữa ADN và ARN Trên thực tế, DNA và RNA đều có chức năng mang thông tin di truyền. Tuy nhiên, giữa 2 loại này vẫn có nhiều điểm khác biệt về cấu tạo. Dưới đây là bảng so sánh tóm tắt về sự khác nhau giữa DNA và RNA.
>>>> ĐỌC THÊM: Hệ thống tách chiết axit nucleic (DNA/RNA) tự động 96 mẫu 3. Điểm giống nhau giữa DNA và RNADNA và RNA đều là các axit nucleic trong cơ thể sống của sinh vật. Cả 2 loại đại phân tử này đều được cấu tạo từ các đơn phân nucleotide và đều là sợi đôi hoặc sợi đơn. Bên cạnh đó, DNA và RNA đều đảm nhận vai trò quan trọng trong quá trình tổng hợp protein. Hai loại phân tử này còn chứa các phân tử đường pentose, nhóm phốt phát và bazơ nitơ. Điểm giống nhau giữa DNA và RNA 4. Mối quan hệ của ADN và ARNDNA và RNA đều là các phần tử đóng vai trò quan trọng trong quá trình tổng hợp protein. Từ kết quả so sánh sự khác nhau giữa ADN và ARN, hai phân tử này sẽ có mối quan hệ như sau: ● ADN có vai trò là khuôn mẫu để hình thành mARN và quy định cấu trúc của protein trong cơ thể. Protein dưới tác động của môi trường sẽ biểu hiện ra các tính trạng. ● DNA chứa nhiều gen cấu trúc, mỗi gen cấu trúc đều mang thông tin khác nhau nên sẽ hình thành nhiều kiểu mARN. ● Trình tự sắp xếp các nucleotit trên mARN sẽ được quy định bởi trình tự sắp xếp các nucleotit trong ADN theo nguyên tắc bổ sung A liên kết U, X liên kết với G, T liên kết với A và G liên kết với X. Mối quan hệ của ADN và ARN >>>> THAM KHẢO THÊM
Trên đây là những kiến thức bổ ích về sự khác nhau giữa ADN và ARN đã được MEDITOP tổng hợp. Hy vọng những thông tin trên sẽ giúp bạn phân biệt được 2 loại phân tử này. Nếu bạn đang có nhu cầu mua các loại máy xét nghiệm thì hãy liên hệ ngay cho chúng tôi để được tư vấn tận tình nhé! Thông tin liên hệ: ● Địa chỉ: 16 BT2 Trần Thủ Độ, Khu Đô Thị Pháp Vân, Hoàng Mai, Hà Nội ● Hotline: 0963.923.329 ● Website: meditop.com.vn Trần Thế Thành Tôi là Trần Thế Thành, hiện đang là Tổng giám đốc của Công ty cổ phần thương mại quốc tế MEDITOP. Với MEDITOP chúng tôi không chỉ là bán hàng mà còn phải thấu hiểu và chia sẻ khó khăn và giải quyết được mọi vướng mắc cho khách hàng. Tin tức liên quan
|
